Kandungan

• Perbezaan Utama
• Blotting Selatan vs. Blotting Barat
• Carta Perbandingan
• Apa itu Blotting Selatan?
• Apa itu Blotting Barat?
• Perbezaan Utama
• Kesimpulannya

Perbezaan Utama

Perbezaan utama antara Southern Blotting dan Blotting Barat ialah Southern Blotting adalah teknik yang digunakan untuk mengesan fragmen DNA spesifik dalam sampel tertentu manakala Western Blotting digunakan untuk mengetahui protein tertentu dalam sampel tertentu.

Blotting Selatan vs. Blotting Barat

Blotting adalah teknik yang digunakan oleh saintis untuk memisahkan pelbagai jenis molekul dari campuran atau sampel. Dalam teknik ini, makromolekul seperti asid nukleat (DNA dan RNA) dan protein dalam campuran bergerak melalui gel gel. Di sini, zarah minit akan bergerak lebih cepat daripada yang lebih besar. Molekul ini ditekan terhadap permukaan membran yang tidak bergerak yang memindahkan molekul ke membran. Terdapat pelbagai jenis pemotongan berdasarkan pengesanan bahan tertentu, iaitu, pembungaan selatan, pembongkaran utara, dan pembongkaran barat. Pembengkakan di selatan adalah jenis pembungkus yang digunakan untuk mengesan DNA manakala pembungkus barat digunakan untuk mengetahui protein. Blotting Selatan dibangunkan oleh Edward M. Southern pada tahun 1975. Jadi, ia dikenali sebagai pembengkakan Selatan. Sebaliknya, pembongkaran barat dibangunkan oleh kumpulan George Stark di Stanford University pada tahun 1979. Nama ini digunakan untuk dipadankan dengan pembengkakan selatan. Pembengkakan di selatan digunakan untuk mengetahui urutan DNA tertentu, sedangkan pembungkus barat digunakan untuk mengetahui asid amino tertentu atau urutan protein.

Carta Perbandingan

Blotting Selatan	Blotting Barat
Satu teknik yang digunakan untuk mengetahui urutan DNA tertentu dalam campuran tertentu dikenali sebagai pembengkakan selatan.	Satu teknik yang digunakan untuk mengetahui urutan amino asid spesifik protein dalam campuran tertentu dikenali sebagai pembungaan di selatan.
Dibangunkan oleh
Pembengkakan Selatan dibangunkan oleh Edward M. Southern pada tahun 1975.	Blotting Barat telah dibangunkan oleh kumpulan George Stark di Stanford University pada tahun 1979.
Jenis Pengesanan
Pembengkakan di selatan digunakan untuk mengetahui urutan DNA tertentu.	Blotting Barat digunakan untuk mengetahui asid amino atau urutan protein tertentu.
Prinsip
Ia berfungsi dengan prinsip hibridisasi.	Ia berfungsi dengan prinsip kaedah immunodetection atau interaksi antigen-antibodi.
Siasat
Satu DNA terkandas atau kadang-kadang RNA digunakan sebagai penyelidikan.	Antibodi primer dan sekunder digunakan sebagai siasatan.
Elektroforesis Gel
Elektroforesis gel agarose digunakan di Southern blotting.	SDS PAGE / Gel polyacrylamide digunakan untuk memisahkan protein di bahagian barat
Prosedur Blotting
Pembengkakan di selatan mengikuti prosedur pemindahan kapilari.	Blotting Barat mengikuti prosedur pemindahan elektrik.
Contoh
Semasa pembengkakan Selatan, sampel perlu denatur.	Semasa pembongkaran barat, sampel mestilah berada di negeri asalnya.
Menyekat
Tidak ada langkah seperti menyekat yang terlibat dalam pembongkaran di selatan.	Semasa pembongkaran barat, tapak antibodi tidak spesifik disekat pada kertas nitrocellulose dengan bantuan susu tepung atau serum albumin (BSA).
Kaedah Pelabelan
Kaedah pelabelan biasa yang digunakan di blotting selatan adalah penggunaan pewarna kromogenik atau radiolabelling atau label fluorescent.	Kaedah pelabelan yang digunakan dalam pembungkus barat adalah penggunaan antibodi berlabel fluoresen atau radiolabelling, pewarna kromogenik atau pembentukan diaminobenzidine, dsb.
Kaedah Pengesanan
Pengesanan cahaya, Autoradiograph, dan perubahan warna digunakan sebagai kaedah pengesanan di blotting selatan.	Kaedah pengesanan di pusat pembongkaran barat adalah perubahan warna dan pengesanan cahaya dan sebagainya.
Permohonan
Pembengkakan Selatan digunakan dalam pengesanan DNA, ujian bapa, penjilid DNA, untuk pengenalan mangsa, untuk mengenal pasti penjenayah, mencari agen berjangkit dan untuk mengenal pasti mutasi atau penyusunan semula gen, dan sebagainya.	Blotting Barat digunakan untuk mencari bilangan protein dalam campuran, untuk mengesan kehadiran HIV, virus, dan bakteria, dan lain-lain dalam serum, untuk mengetahui protein yang rosak dan digunakan sebagai langkah yang pasti untuk herpes, hepatitis B, Lyme penyakit, dan penyakit Creutzfeldt-Jacob, dan sebagainya.

Apa itu Blotting Selatan?

Pembengkakan di selatan adalah kaedah pembungkaman tertua yang diberikan oleh Edwin Southern sehingga disebut sebagai pembungaan selatan. Ia digunakan untuk mengetahui jujukan DNA tertentu dalam sampel atau campuran yang diberikan. Langkah-langkah yang melibatkan pembengkakan di selatan ialah elektroforesis, pemindahan, dan pengesanan urutan tertentu. Pertama sekali, DNA dipecah dengan bantuan enzim sekatan tertentu. Kemudian fragmen DNA yang diingini dipisahkan melalui elektroforesis gel. Serpihan ini denatured dengan bantuan penyelesaian alkali, mis., NaOH, dan sebagainya untuk memisahkan dua helai DNA. Serpihan DNA tunggal terkandas kemudian dipindahkan ke dalam membran melalui proses pembungkus. DNA sempit membran ini kemudian dirawat dengan probe berlabel. Siasatan ini akan dilampirkan kepada helai pelengkap pada DNA membran yang boleh digambarkan oleh autoradiogram dan lain-lain.

Apa itu Blotting Barat?

Kaedah pembungkus Barat dicipta oleh kumpulan George Stark di Stanford University yang digunakan untuk mengenal pasti urutan spesifik asid amino dalam protein. Ia juga dikenali sebagai blot protein atau kekebalan. Langkah-langkah semasa pembongkaran barat adalah elektroforesis, pemindahan, dan pengesanan protein tertentu. Pertama sekali, homogenkan campuran. Kemudian bahagikan molekul minat dengan bantuan elektroforesis. Mentransfer molekul-molekul ini ke dalam membran dan kenal pasti protein spesifik dengan menggunakan siasatan khusus.

Perbezaan Utama

1. Satu teknik yang digunakan untuk mencari jujukan DNA tertentu dalam campuran tertentu dikenali sebagai pembungaan selatan, sedangkan teknik yang digunakan untuk mengetahui urutan asam amino spesifik protein dalam campuran tertentu dikenal sebagai pembungaan di selatan.
2. Blotting Selatan dibangunkan oleh Edward M. Southern pada tahun 1975, yang dikenali sebagai pembungaan selatan. Sebaliknya, pembongkaran barat dibangunkan oleh kumpulan George Stark di Stanford University pada tahun 1979.
3. Pembengkakan di selatan digunakan untuk mengetahui urutan DNA tertentu. Sebaliknya, pembongkaran barat digunakan untuk mengetahui asid amino tertentu atau urutan protein.
4. Kerja-kerja pembongkaran di selatan pada prinsip hibridisasi di sebelah flip; kerja pembongkaran barat berdasarkan prinsip kaedah immunodetection atau interaksi antigen-antibodi.
5. Satu DNA terkandas atau kadang-kadang RNA digunakan sebagai penyelidikan di Southern blotting di sisi lain, di barat membusukkan antibodi primer dan sekunder digunakan sebagai penyelidikan.
6. Elektroforesis gel agarose digunakan di blotting selatan manakala SDS PAGE / gel polyacrylamide digunakan untuk memisahkan protein di blotting barat.
7. Pembengkakan di selatan mengikuti prosedur pemindahan kapilari, sebaliknya; Blotting barat mengikuti prosedur pemindahan elektrik.
8. Semasa pembengkakan Selatan, sampel perlu denatur, sedangkan, semasa pembusuhan barat, sampel harus berada dalam keadaan asalnya.
9. Tidak ada langkah seperti penghalang yang terlibat dalam pembungkus di sebelah selatan, semasa pembongkaran barat, tapak antibodi spesifik tidak disekat pada kertas nitrocellulose dengan bantuan susu tepung atau serum albumin (BSA).
10. Kaedah pelabelan biasa yang digunakan di blotting selatan adalah penggunaan pewarna kromogenik atau radiolabelling atau pelabelan fluorescent dan sebagainya. Sementara itu, kaedah pelabelan yang digunakan dalam pembungkus barat adalah penggunaan antibodi berlabel fluoresen atau radiolabelling, pewarna kromogenik atau pembentukan diaminobenzidine, dan sebagainya.
11. Pengesanan cahaya, Autoradiograph, dan Perubahan warna digunakan sebagai kaedah pengesanan di blotting selatan, sedangkan, kaedah pengesanan di blotting barat adalah perubahan warna dan pengesanan cahaya, dll.
12. Pembengkakan Selatan digunakan dalam pengesanan DNA, pengujian bapa, penjurian DNA, untuk identifikasi mangsa, untuk mengenal pasti penjenayah, untuk mencari ejen berjangkit dan untuk mengenal pasti mutasi atau penyusunan semula gen, dan sebagainya. Sebaliknya, pembengkakan barat digunakan untuk mencari bilangan protein dalam campuran, untuk mengesan kehadiran HIV, virus, dan bakteria, dan lain-lain dalam serum, untuk mengetahui protein yang rosak dan digunakan sebagai langkah yang pasti untuk herpes, hepatitis B, penyakit Lyme, dan penyakit Creutzfeldt-Jacob, dan sebagainya.

Kesimpulannya

Perbincangan di atas merangkumi bahawa pembengkakan di selatan adalah teknik membungkus tertua yang digunakan untuk mencari segmen DNA spesifik dalam sampel sementara pembengkakan barat dijumpai kemudian dan digunakan untuk mengenal pasti urutan spesifik asid amino atau protein tertentu.